霍乱弧菌显色培养基培养基

霍乱弧菌显色培养基用于水产品和食物中毒样品中霍乱弧菌的分离鉴定。

霍乱弧菌显色培养基的原理：

蛋白胨和酵母提取物粉末提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；蔗糖是一种可发酵的糖；抑菌剂可抑制大多数非霍乱弧菌，氯化钠可保持渗透压平衡；琼脂是培养基的促凝剂；该色素与霍乱弧菌所具有的酶发生特异性反应，水解底物lb培养基配方，释放显色基团，在淡黄色板上产生绿-蓝-绿色菌落。

霍乱弧菌显色培养基配方（每升）：

蛋白胨 15g

酵母提取物粉 5g

蔗糖 10g

氯化钠 5g

抑菌剂 5g

琼脂 13g

颜料3.1g

最终 pH 9.0±0.2

如何使用霍乱弧菌显色培养基

1、在瓶中取56.1克干粉，溶于100ml蒸馏水或纯净水中，可按比例放大或缩小。搅拌、加热并煮沸直至完全溶解，无需高压灭菌，冷却至约 50°C，倒入消毒过的盘中。

2、无菌操作取试样25 g(mL)，加入碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片均质机8 000 r/min均质1 min，或拍打均质机2 分钟以制备 1:10 的均匀稀释液。如果没有均质器lb培养基配方，将样品放入无菌研钵中研磨，然后放入 500 mL 灭菌容器中，加入 225 mL 碱性蛋白胨水，摇匀。

3、富集：将上述1:10稀释液在36℃±1℃孵育6h~8h，必要时进行二次富集。

4、分开

从富集溶液中取一个环，在霍乱弧菌显色板上划线，并在 36 °C ± 1 °C 下孵育 18 小时至 24 小时。

5、通过氧化酶、革兰氏染色等验证试验进一步证实了推定的霍乱弧菌。